Rilevazione acida nucleica del coronavirus novello

La rilevazione acida nucleica ha le caratteristiche della diagnosi precoce, di alta sensibilità e della specificità ed è «la parità aurea» per la diagnostica della polmonite coronaria nuova. Attualmente, la tecnologia quantitativa fluorescente di RT-PCR in tempo reale più ampiamente usata. Generalmente, i due obiettivi situati sui geni di N e di ORF1ab del virus sono individuati. Lo stesso esemplare deve incontrare il doppio positivo dell'obiettivo o la prova ripetuta come il singolo positivo dell'obiettivo, o i due esemplari devono raggiungere il singolo obiettivo allo stesso tempo per confermare il positivo dell'acido nucleico del virus SARS-CoV-2.

1. Principio di corredo acido nucleico di rilevazione? La sequenza unica del gene del virus è usata come l'obiettivo di rilevazione. Con l'amplificazione di PCR, la sequenza del DNA dell'obiettivo scegliamo gli aumenti esponenzialmente. Ogni sequenza amplificata del DNA può combinarsi con una sonda fluorescente-identificata che abbiamo aggiunto in anticipo. , Segnale fluorescente dei prodotti, più geni amplificati, più forte dell'obiettivo il segnale fluorescente accumulato. In campioni senza virus, poiché non c'è amplificazione del gene dell'obiettivo, nessun aumento nel segnale della fluorescenza può essere individuato. Di conseguenza, la rilevazione acida nucleica è realmente di determinare se c'è acido nucleico virale nel campione individuando l'accumulazione dei segnali fluorescenti.

2. Che cosa sono i tipi di prove acide nucleiche campioni?

Generalmente, tamponi nasali, tamponi della gola, tamponi rinofaringei, espettorato, fluido di lavaggio bronchiale, fluido di lavaggio alveolare ecc.

3. la rilevazione di Cinque-punto la nuova procedura di rilevazione del coronavirus richiede cinque punti: campionamento, conservazione del campione, stoccaggio, estrazione acida nucleica e prova del computer. Ciò richiede gli esperimenti scientifici rigorosi di completare.

1. Pulisca la parete posteriore del tampone faringale e delle tonsille faringali bilaterali 5-10 volte ciascuna con un tampone faringale e continui girare il tampone;

2. Il personale medico è tenuto a tenere il campione e la testa del tampone è immersa nella soluzione di conservazione delle cellule e la coda è rotta. Stringa immediatamente il cappuccio del tubo;

3. Conservi, metta il tubo del campione in una borsa sigillata ed inviarla per ispezione a tempo ed il processo di ispezione richiede un ambiente rigoroso del trasporto, immagazzinato centigrado a 2-8 gradi.

4. Azioni l'estrazione acida nucleica, estragga l'acido nucleico dal campione inattivato del virus per rilevazione successiva ed utilizzi l'attrezzatura automatizzata, quale un estrattore acido nucleico.

5. Rilevazione acida nucleica di PCR della fluorescenza, cioè, la rilevazione della macchina, richiede 70-80 minuti affinchè l'estratto subisca la reazione fluorescente di amplificazione di PCR.

4. Che cosa sono i problemi con rilevazione acida nucleica?

Il falso negativo, dovuto il campionamento improprio, lo stoccaggio improprio dell'esemplare, l'uso dei tipi differenti di esemplari e l'uso dei reagenti dai produttori differenti può indurre i risultati dei test acidi nucleici ad essere «falso negativo» e diagnosi mancante;

Gli alti requisiti delle attrezzature o delle piattaforme di rilevazione, alti strumenti della sensibilità RT-PCR sono costosi e richiedono l'alta pulizia e gli operatori del laboratorio;

La prova acida nucleica richiede molto tempo e richiede solitamente 4-6 ore per completare una prova di RT-PCR. Tuttavia, considerando il trasporto del campione, nel caso di grande lavoro arretrato dei campioni, i risultati possono essere riferiti solitamente non appena 24 ore. Di conseguenza, quando la prova acida nucleica è negativa, l'aggiunta rilevazione dell'anticorpo di IgG e di IgM può compensare le imperfezioni che la prova acida nucleica è probabile causare a diagnosi mancante.